Zusammenfassung

1.Vorhabenziel:Ziel dieser Studie ist es, einen neuen Weg für den Nachweis von Eigenblutdpoing im Sport zu entwickeln. Hierbei sollen physiologische Veränderungen, welche durch die Blutkonservenlagerung und die Anwendung von Stabilisatoren während der Lagerung verursacht werden auf der Ebene des Transkriptoms erfasst werden. Sensitive Gene, deren Expression auf mRNA und microRNA Ebene stark reguliert werden können als Biomarker agieren. In Verbindung mit speziellen biostatistischen Methoden soll es ermöglicht werden Sportler nach Eigenblutdoping anhand dieser Biomarker zu identifizieren.
2.Arbeitsplanung: 1. Etablierung Lagerungsstudie an humanen Proben 2. Etablierung Lagerungsstudie an bovinen Proben mit autologer Transfusion 3. Etablierung geeigneter Methoden zur Separation von Erythrozyten aus Vollblut bei Mensch und Rind 4. Lagerung von Blutkonserven, einerseits als Vollblut und als Erythrozytenpräparat, mit unterschiedlichen Konservierungspuffern 5. Beprobung nach definierten Lagerungszeiten bei einer Lagerung bis zu 3 Monaten, sowie nach der autologer Transfusion im Kalb 6. Total RNA Extraktion und Qualitätsbestimmung 7. Bestimmung geeigneter Kandidaten Biomarker auf mRNA und microRNA mittels high throughput RNA Sequencing 8. Bestätigung der Kandidaten mittels real-time RT-qPCR 9. Statistische Validierung Auswertung der Biomarker 10. Entwicklung einer validen humanen Biomarkersets zum Nachweis von humanem Eigenblutdoping und dessen Anwendung mittels real-time RT-qPCR Geplante Ergebnisverwertung: Im Rahmen dieses Projektes sollen Transkriptions-Biomarker auf mRNA und microRNA Ebene gefunden und validiert werden die in Zukunft einen erstmaligen Nachweis für Eigenblutdoping im Spitzensport erlauben. Die gefundenen Ergebnisse sollen als internationale Publikationen in renommierten Fachjournalen erscheinen, und auf internationalen Konferenzen vorgestellt werden.