Abstract

Durchflusszytometrie ist eine vielseitige Methode, um individuelle Zellen inmitten einer gemischten Population gleichzeitig auf verschiedene Parameter zu analysieren. Sie basiert auf der Analyse von Streulicht und Fluoreszenzsignalen, die durch Laserlichtquellen angeregt werden. Zellgröße und Granularität ebenso wie Dichte und Verteilung multipler Marker auf der Oberfläche oder im Zytoplasma der Zelle können mit Hilfe spezifischer fluoreszenzmarkierter Antikörper bestimmt werden. Anwendungsmöglichkeiten umfassen: Immunophänotypisierung mittels Oberflächenmarker, Analyse von intrazellulären Antigenen, Nukleinsäuregehalt, Phagozytose, Oxidativem Burst, Kalziumflux, pH, Membranpotential und Apoptose. Auch in der Sportimmunologie wird die Methode mittlerweile häufiger genutzt. Sportinduzierte Veränderungen von Leukozyten und Lymphozytensubpopulationen wie NK- (CD16/CD56), T-helfer (Th) and T-zytotoxisch (Tc) Zellen (CD4, CD8) einschließlich Subtypen Th1/Tc1 und Th2/Tc2 entsprechend ihrer Zytokinproduktion (IFNgamma, IL-2 and IL- 4), naive und Gedächtnis- und Effektor-T-Zellen (CD45RO, CD62L, CD11a), intrazelluläre Zytokine und Hitzeschockproteine (HSP), Thrombozytenaktivierung, Kalziumsignaling, Phagozytose and Oxidativeburst- Aktivität, Reifungsstadien von Monozyten und dendritischen Zellen und Apoptose wurden in verschiedenen Studien untersucht. Anhand einiger ausgewählter Beispiele werden die Methode und ihre Anwendungsmöglichkeiten in der Sportimmunologie vorgestellt. Verf.-Referat

Abstract

Flow cytometry is a powerful analytical technique in which individual cells within mixed populations can be simultaneously analyzed for several parameters based on light scatter and fluorescence analyses using laser lamps. Cell size and granularity, as well as density and distribution of multiple markers defined by specific fluorescent antibodies on the cell surface and in the cytoplasma can be determined. Applications range from immunophenotyping using surface markers, analyses of intracellular antigens, nucleic acid content, phagocytosis, oxidative burst, calcium flux, pH, membrane potential and apoptosis. Flow cytometry is also widely used in exercise immunology. Exerciseinduced changes of leukocyte and lymphocyte subsets such as NK-cells (CD16/CD56), T-helper (Th) and T-cytotoxic (Tc) cells CD4, CD8) including further division in Th1/Tc1 and Th2/Tc2 subtypes according to their cytokine production (IFNgamma, IL-2 and IL-4), naive and memory T cells (CD45RO, CD62L, CD11a), of intracellular cytokines and heat shock proteins (HSP), platelet activation, intracellular calcium signaling in granulocytes, phagocytic and oxidative burst activity, alterations of dendritic cells (CD33) after exercise, lymphocyte apoptosis, different maturation stages of monocytes were investigated. Representative examples are provided for the potential use of flow cytometry in exercise immunology. Verf.-Referat