Abstract

Verletzungen der Kreuzbaender sind in der sportmedizinischen Praxis ein haeufiges Ereignis. Die spontane Heilungstendenz dieser Laesionen ist allerdings begrenzt. Eine Vielzahl von Wachstumsfaktoren erscheinen derzeit als vielversprechende Substanzen, um den natuerlichen Reparationsprozess zu unterstuetzen, allerdings sind diese Substanzen klinisch nur mit unzureichender Wirkung zu applizieren. In dieser experimentellen Studie untersuchten wir die Moeglichkeit des Gentransfers unter Verwendung des lacZ- und des neo-r-Markergens, um Wachstumsfaktoren in Baendern und Sehnen zu exprimieren. Zellkulturen wurden aus dem vorderen und hinteren Kreuzband, der Patellarsehne und der Semitendinosussehne von weissen Neuseelandkaninchen angelegt. Wir konnten zeigen, dass ein E1-E3- adenoviraler Vektor mit dem lacZ-Markergen effektiv diese Fibroblasten transduziert. Mit der gleichen Technik zeigten wir, dass eine retrovirale Transduktion und Selektion in G418 durch das neo-r-Gen moeglich ist. Um festzustellen, ob Zellen in situ genetisch modifiziert werden koennen, wurde der direkte Gentransfer (In-vivo-Technik) mit Adenovirus-LacZ und der indirekte Gentransfer (Ex-vivo-Technik) mit dem Retrovirus BAG LacZ neo-r durchgefuehrt. Die direkte perkutane Injektion von Adenoviren in die Patellarsehne fuehrte zu einer hohen LacZ-Expression, war jedoch auf das unmittelbare Injektionsgebiet beschraenkt, vorwiegend auf die synoviale Schicht. Ein unerwartetes Ereignis dieses Experimentes war die Transduktion von Knochenzellen als Folge einer unbeabsichtigten Injektion in die Ansatzzone der Patellarsehne. Die Transplantation retroviral transduzierter und neo-r-selektierter Fibroplasten zeigte eine LacZ-Expression in der gesamten Patellarsehne. Zahlreiche LacZ-positive Fibroplasten waren entfernt von der Injektionsstelle zu finden, wo sie sich in das Crimpmuster integrierten. Beide Versuchsanordnungen fuehrten zu einer LacZ-Expression von sechs Wochen. Nach unserem derzeitigen Kenntnisstand ist diese Expressionsdauer ausreichend, um wirksam einen Reparationsprozess einzuleiten. Verf.-Referat